Shu tariqa Guillaume Gallienne, Mesgishning "Komedi Franses" teatridagi mashhur sahnalashtirishidagi Shekspirning "Bo'ron" asarida jarohatlangan aktyorni o'rnini egalladi. Xuddi o'sha 1998 yil iyul oqshomida u yordamchi truppa a'zosi sifatida qabul qilindi va Xorxe Lavellining rahbarligidagi Breyxtning "Onasi Kuraj va uning bolalari" spektaklida rol o'ynadi. 2005 yilda u "Komedi Franses" asosiy truppasining 513-chi a'zosi bo'ldi. Ushbu lavozimda u ko'plab spektakllarda, jumladan, Simon Eynening sahnalashtirishidagi Mol'erning "O'rganuvchi ayollar", Jyerom Deshamning rahbarligidagi Feydoning "Go'zal ajralish san'ati" asari uchun eng yaxshi ikkinchi reja roli uchun Mol'er mukofotini olgan, Chexovning "Uch opa-singillari", Alen Fransoning sahnalashtirishidagi Goldonining "La Trilogie de la villégiature", Volodi Serraning sahnalashtirishidagi Goncharovning "Oblomovi" (keyinchalik 2017 yilda Arte televideniyesi uchun moslashtirilgan), Deni Podalidesning sahnalashtirishidagi Alfred de Myussening "Fantazio"si, keyinchalik Galliennaga Gyugoning "Lukretsiya Borgia" asarida bosh rolni ishonchli topshirgan, va Ivo van Xovening sahnalashtirishidagi Viskontining "La Maudits" asarida rol o'ynagan.
Mashhur truppa tashqarisidagi teatr faoliyati doirasida Gallienne, Tokiodagi Tessenkai Noh teatrida Sartarning "Yopiq eshiklar orqasida" asarini sahnalashtirdi. Bundan tashqari, Parij Milliy Operasida Nikolay Le Rishning "Kaligula" baletining syujetini ishlab chiqish va dramaturgiyasini yozdi, shuningdek, Buyuk Teatrda Aleksey Ratmanskiyning "Yo'qotilgan illuziyalar" dramaturgiyasini yozdi. 2017 yilda u o'zining birinchi lirik asarini - Rossinining "Sinderella" operasini Parij Milliy Operasida sahnalashtirdi. 2008-2010 yillarda televidenieda kino sanoatini parodiya qiluvchi "Les Bonus de Guillaume" skech-komedi seriali katta ommalashgan edi. 2009 yil sentyabridan beri u "France Inter" radiolasida "Ça peut pas faire de mal" nomli haftalik shouda buyuk adabiy asarlarni o'qiydi. 2018-2019 yillarda u bir semestr davomida Belknap Gumanitar Fanlar Kengashining uzoq muddatli stipendiyasi va Fransuz va Italiya tillari bo'yicha mehmon lektor sifatida Prinston Universitetida teatr san'atini o'rgatdi.
Bolaligida Guillaume Gallienne onasini mukammal taqlid qilishni o'rgangan. U bu iqtidorini 2008 yilda Klod Matye tomonidan sahnalashtirilgan "Garsons va Guillaume, stolga!" avtobiografik asarida yetkazgan va ikki yildan keyin eng yaxshi boshlang'ich aktyor sifatida Mol'er mukofotini olgan. Tanqidchilar va tomoshabinlar oldidagi bu muvaffaqiyat 2013 yilda, bir xil nomdagi kino versiyasi uch million tomoshabinni jalb qilgan va beshta "Sezar" mukofotini, jumladan, eng yaxshi erkak roli va eng yaxshi film uchun olganida tasdiqlandi. Guillaume shuningdek, bir qator badiiy filmlarda, masalan, Fabien Ontenienning "Svetliklar", Sofiya Koppolaning "Mariya-Antuanetta", Daniel Tompsonning "Mesta v partere" va "Sezan va men", Nils Arestupning "Kandidat", Diana Kurisning "Sagan", Pascal Tomasning "Birga katta sevgi tarixini yashaymiz", Jhalil Lesperning "Iv Sen-Loran" va Per Godoning "Rokovoe vlechene" filmalarida rol o'ynagan. "Merilin", Gallienne tomonidan o'z ssenariysi bo'yicha suratga olingan ikkinchi film, 2017 yil noyabr oyida ekranga chiqdi.
